DNase I

DNase I

DNase I（脱氧核糖核酸酶I）是一种从牛胰腺纯化的核酸内切酶，分子量约31 kDa，可在钙离子存在下随机水解单链或双链DNA的磷酸二酯键，生成以5’-磷酸为末端的寡核苷酸片段。其活性受镁离子或锰离子调控：镁离子激活时随机剪切DNA，锰离子激活时可在同一位点切割形成平末端或粘性末端。该酶比活度为22-24单位/mg，储存条件为-20℃ 。

DNase I主要用于制备无DNA污染的RNA样品、体外转录后清除模板DNA以及RT-PCR反应中去除基因组DNA污染。在染色质处理中，其优先切割位于转录起始位点附近的DNase I超敏感位点（DHSs） 。该酶还可用于DNase I足迹法分析蛋白质-DNA相互作用、探针标记及表观遗传学研究 。活性可通过65℃加热10分钟或EDTA螯合失活 ，反应缓冲液含100 mM Tris（pH 7.5）、25 mM MgCl₂及5 mM CaCl₂ 。

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